Alyssa Jayne Milano è nata il 19 Dicembre 1972 a New York (USA), figlia di Tom e Lin Milano, ha un fratello minore, Cory (nato nel 1982), anch'egli attore.
Una delle sue prime apparizioni in video fu in un programma televisivo, "Casalingo Superpiù" (nome originale "Who's the Boss?") con Tony Danza. Alyssa fu a lungo ricordata proprio per questo ruolo, da cui cercò di liberarsi recitando in vari film per adulti, molti dei quali includevano scene di nudo o piuttosto esplicite. Esordisce sul grande schermo accanto ad un attore famoso, Arnold Schwarzenegger in "Commando" nel 1985.
La svolta definitiva della carriera di Alyssa si ebbe con il successo delle serie "Melrose Place" e, soprattutto, "Streghe".
Alyssa è inoltre una buona cantante, sebbene negli Stati Uniti non sia molto conosciuta per le sue doti vocali. Ha infatti inciso cinque album che le hanno permesso di vendere un milione di copie in Giappone. Da segnalare una sua apparizione nel video dei Blink-182 per la canzone "Josie".
Nel 1989 il volto della Milano fu usato come modello per sviluppare il personaggio di Ariel nel film Disney "La Sirenetta".
Alyssa Milano è una fan dei tatuaggi e ne possiede diversi.
Dopo il divorzio con Cinjun Tate, leader dei Remy Zero, Alyssa ha cominciato a frequentare Barry Zito, lanciatore della squadra degli Oakland Athletics.
Nella serie televisiva "Streghe", Alyssa non fu la prima scelta di Aaron Spelling per il ruolo di Phoebe. Fu chiamata come sostituta quando Lori Rom (la prima scelta), se ne andò per motivi personali. La prima puntata della prima serie, infatti, è stata rigirata completamente per quanto riguarda le riprese interne alla casa e quelle in cui era presente Phoebe: in alcune scene si possono infatti notare delle differenze fra le riprese all'esterno della casa e quelle al suo interno.
Alyssa fuma ed è dislessica.
Alyssa ha avuta una relazione con il suo collega di "Streghe" Brian Krause, con Jason Behr, protagonista della serie TV drammatica "Roswell", il cantante rock Fred Durst dei Limp Bizkit, e dal giugno 2003 frequenta l'attore Eric Dane, già ex-fidanzato dell'attrice Lara Flynn Boyle.
La Milano apparirà per alcuni episodi nella serie TV "My Name Is Earl" e si sta dedicando al Cinema. Dal mese di Ottobre 2007 ha intrapreso anche la carriera di Telecronista di Baseball (sua grande passione) per la MLB (Major League Baseball).